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实验室检查诊断甲鱼常见病害

【 发布时间:2021-10-26 】

 
    检查的目的是具体了解疾病的病症,查明病原,为确诊打下基础。检查分体检查、剖检和实验室检查。以下介绍实验室检查。实验室检查的工作主要包括镜检、病毒分离、细菌培养、生化试验、电镜观察等。

    1.镜检:在整个实验室检查中随时会用到镜检,但第一步镜检的目的是为了检查有无寄生虫存在。用玻片压展法制片,部位是体表和内脏器官的黏液、病灶、血液,然后在显微镜下观察。

    2.病毒分离:病毒检查的方法很多,这里介绍一种比较简单取病鳖的脑、肝、脾、肾、胆等内脏器官用灭菌生理盐水洗2~3次后,剪碎,匀浆机匀浆,加入含200单位(微克)/毫升青霉素、链霉素的双抗HanK's液,制成10%~20%的组织悬液,再以2000转/分钟离心10~20分钟,吸取上清液分别接种于已长成单层的FHM、EPC或其它传代细胞,置培养箱中37℃下培养。7天后将接毒的培养细胞冻融1次,吸取该细胞冻融液1毫升盲传于另一瓶正常传代细胞中,为盲传一代,依此盲传3~4代后,将病毒的细胞培养物在铜网上吸附,用2%磷钨酸负染,电镜下观察病毒颗粒。与此同时进行病毒核酸类型的鉴定、耐酸性试验和乙醚抵抗性试验等理化特性检验,对病毒进行综合鉴定。

    如果你仅仅想知道疾病是否由病毒引起,而无需了解是哪一种病毒时,有一种方法更简单方便:取病鳖的肝、肾、脾等组织,用灭菌生理盐水冲洗2~3次后,剪碎研磨成组织悬液,加入青霉素、链霉素各1000国际单位/毫升,作用一段时间后,离心取上清液,按每只0.2毫升的量注射于健康小甲鱼,饲养一段时间后,观察有无病症出现,可确定该疾病是否由病毒引起。

    3.细菌分离:无菌操作取病鳖体表病灶和内部器官的病变组织,用接种环反复插入后,划线接种于营养琼脂平皿,放入30℃恒温箱中培养24小时后,观察各菌落形态,并挑取各菌落涂片,经革兰氏染色后显微镜下观察细菌形态。同时,挑取各菌落分别划线于营养琼脂平皿、新鲜鸡血琼脂平皿,置于30℃下进行纯化,培养24小时后,再涂片,进行革兰氏染色和鞭毛染色,显微镜下观察细菌形态结构。有条件的地方,可取细菌培养物铜网上制膜,2%磷钨酸(pH值7.0)负染后,电镜下观察细菌的细微结构。

    然后,将各菌株进行各种生理生化试验,确定其生长适温、各种理化特性。

    最后,根据其细菌菌落颜色、大小、有无溶血现象以及菌株的形态、大小、生长适温和各种理化特性,参考《一般细菌常用鉴定方法》、《伯杰氏细菌鉴定手册》、《动物微生物学》、《水产动物疾病学》等书籍资料,确定病原菌的名称。有条件的地方,最好加一步动物感染试验和鳖的感染试验,确定几种菌株中,哪一种或几种是主要致病菌。

    在此基础上,可分别对几种菌作药敏试验,确定治疗药物。